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建库

2023/3/20 16:42:47

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详细介绍

       利用全新设计多组简并引物,引物更全面,得到更多单域抗体,覆盖面广,高库容及高质量文库为后续筛选打好坚实基础。多组简并引物进行PCR扩增,大量获取VHH抗体,将特异性片段与噬菌体载体进行连接电转化后进行菌液培养,过夜培养后进行单菌落计数,库容量为大于108cfu ,回收菌体进行冻存,随机挑选单菌落进行片段插入率鉴定,菌液测序进行多样性分析。

技术环节

技术服务内容

规格

周期 

建库

RNA提取;

cDNA反转录;

VHH 巢式PCR扩增与产物处理;

构建细菌库,抗体库容量≥n×108n>1

基因库的质控:VHH片段插入率及多样性检测,菌落PCR验证插入率﹥99%,随机挑取30个克隆测序,无重复序列 

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