可构建高库容量的噬菌体展示文库，同时操作简单，周期短且不需要特殊的仪器，是目前国内外最常用的纳米抗体发现平台。筛选的方法主要分为固相筛选和液相筛选两种。通过生物淘洗法、竞争法、消减法、选择性感染筛选、延迟性感染筛选等方法可以对和靶蛋白强力结合的基因片段筛选出来。具体地，筛选过程以靶蛋白为固定相，以噬菌体展示文库为流动相，经过一段时间的共同孵育后，洗去未结合的游离噬菌体，然后以竞争受体或酸洗脱下与靶分子结合吸附的噬菌体，洗脱的噬菌体感染宿主细胞后经繁殖扩增，进行下一轮洗脱，经过3轮～5轮的“吸附-洗脱-扩增”后，即可得到与靶蛋白具有高亲和性的抗体。经过筛选后，对筛选得到的蛋白进一步用酶联免疫吸附测定或免疫印迹法对其进行特异性筛选，获取目的克隆或铺盘进行单克隆分离继而进行大规模生产。

      根据实际情况，选择不同的筛选方案，如固相筛选，液相筛选等筛选方法。 

      1）若您倾向于纳米抗体的多样性，则我们采用传统固相筛选方法，共进行三轮筛选，控制噬菌体投入量，增加每一轮鉴定个数。 

      2）若您倾向于纳米抗体的高亲和力，则我们采用液相筛选，共进行3-4轮筛选，所得纳米抗体序列数会少一些。

       包被抗原蛋白，固相筛选2-3轮后，随机挑选单克隆到深孔板中进行培养，加入辅助噬菌体进行感染后过夜培养，取过夜培养上清做ELISA检测，可获得大量高亲和力结合抗体。

技术环节	技术服务内容	规格	周期
筛选	筛选用噬菌体库生产和质控监测； 采用传统固相筛选方法，共进行2-3轮筛选，控制噬菌体投入量，监测每一轮筛选所得到噬菌体的富集指数，必要时进行一次单克隆噬菌体ELISA（1-2/96孔板）测定和单克隆噬菌体序列测定	测序50-100个噬菌体克隆	2-3周
单克隆筛选	VHH在大肠杆菌中表达库的构建；挑选单克隆进行96孔深孔板培养、诱导表达ELISA筛选5-10板根据OD450值，挑取单克隆进行测序，测定200-500个克隆序列，分析测序结果并对序列进行分类提供5-10个不同序列特异性克隆	套(1-2次)	2-3周